Nat Neurosci:对小鼠,非人类灵长类动物和人类中功能不同的中间神经细胞进行病毒操作

2022-01-24 03:40:20 来源:
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大规模的核苷酸组研究正在促使揭示在特定细胞类型里面何时何地强调与神经元思维病因就其的遗传物质。理解和治疗这些病因的工具将只能核酸和操纵者特定神经元系统亚型的工具。因此,在非人类所猩猩和人类所里面接触这些人群已变得至关重要。改组瘤就其大肠杆菌(rAAVs)是在神经元系统里面完成遗传物质传递的首选工具,对特定的神经元系统个体没有内在的并不需要性。系统的弱化子注意到已经通过允许以单细胞分辨率完成核苷酸组和一般说来大肠杆菌学研究的高效率的同类型演进而得到加速。但对于弱化子并不需要的搜寻空间仅仅更大。为了集里面我们的弱化子并不需要,作者并不需要专为研究Scn1a的核苷酸态势,Scn1a是在多种不同神经元系统个体里面强调的遗传物质,其破坏与相当严重的病症病就其。为基础用做易位易位染色质基因组(scATAC-seq)数据的单细胞测定与包涵物种的脱氧核糖核酸保守派性相为基础,作者在该遗传物质不远处高票了十个候选核苷酸脱氧核糖核酸。作者未确定了三种弱化子,共同核酸强调Scn1a的神经元系统个体的广度。其里面,一种特定的短核苷酸脱氧核糖核酸能够将大肠杆菌强调限制为强调PV的小脑里面间神经元系统(PV cIN)。

工具:四名受试者(两名男性/两名女同性恋,年龄22-57岁)不能接受了一项外科,切除了人脑组织起来(小脑和鲎体)以治疗细菌性病症。在所有的流感里面,每个举例来说都曾不能接受过一次初步的外科手术,放置硬膜下和/或剖面导线完成发育不全监控,以未确定病症发作的位置。从鲎和小脑所取300μm外皮,在鲎外皮里面,大肠杆菌的核酸是基底膜亚区。在牛痘大肠杆菌后7~14d对培养的人外皮完成电生理记录。将培养的人外皮转移到记录三楼。对固有膜和真空管特性完成研究。毒素分别保持在17.8–26.1℃和30–70%的巨观环境污染温度和湿度各地区。这些参数被保持良好监控和控制在比如说聚居三楼。从麻省理工学院(MIT)的个体里面获得了一只雌性基本上雌兽兔(6岁将近)。年长(2岁)雄性猕兔(macacamulatta)来自俄勒冈州大学戴维斯理工学院的俄勒冈州国家猩猩研究里面心。在小鼠脑外皮器(Zivic Instruments)上完成锥体外皮,并在冰冷的人工白带液(ACSF)里面解剖学V1小脑。经过处理后,使用使用Nova-Seq S2 100循环试剂盒(Illumina)完成基因组。

结果:在才会或病理演进才会(仅限于Dret囊肿)安全检查开关商业化的中期动态的主要障碍是,在不使用转遗传物质动物的才会无法进到特定的细胞类型。即使转用复杂的遗传策略,年轻的PV cIN也很难成为靶标。考虑到它们的总质量(它们亦然所有血清素cIN的40%)并且显现得相对更晚。更广泛地说,在本研究里面未确定的弱化子包括了带有特殊临床意义的神经元系统个体的访问简而言之。最明显的是,这些弱化剂可以通过遗传物质临床或通气神经元系统活性而潜在地用做减缓Dret囊肿的衰落症状。作者不可否认角化和脸部针头可用做有效的大肠杆菌传递到人脑。通过角化针头,可能改善局灶性病症,PFC性疾病或鲎记忆障碍。相比,系统性引入大肠杆菌可用做只能上半年干预的才会,例如,忽视普遍性病症发作或思维病和神经元退行性病因。作者的研究断定,对核苷酸元素的恰当鉴定为治疗环境污染里面特定细胞类型的获所取包括了指示牌。重要的是,不可否认我们的弱化子并不需要工具可示范到其他遗传物质。总体而言,我们注意到了一个大七个针对多种不同神经元系统个体和里面枢神经元系统地区带有与众不同依赖性的弱化剂。即使转用了恰当的新标准(对目标人群的并不需要性> 90%),我们的工具仍带有显着的成功率(> 20%)。此外,正如离地保守派的脱氧核糖核酸所得出的那样,作者测试的弱化邻域在仅限于人类所在内的所有物种里面被证明带有同等的并不需要性和有效性。

Vormstein-Schneider, D., Lin, J.D., Pelkey, K.A. et al. Viral manipulation of functionally distinct interneurons in mice, non-human primates and humans. Nat Neurosci (2020).

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